Pengaruh Konsentrasi Ekstrak Daun Sirih (Piper betle L.) terhadap Pertumbuhan Streptococcus mutans secara In Vitro

Abstrak

Daun sirih (Piper betle L.) dikenal memiliki kandungan senyawa antibakteri alami yang potensial, seperti fenol, flavonoid, saponin, tanin, dan minyak atsiri. Salah satu bakteri yang berperan penting dalam proses terjadinya karies gigi adalah Streptococcus mutans, bakteri gram positif yang dapat berkolonisasi di permukaan gigi dan menghasilkan asam yang merusak struktur email. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh berbagai konsentrasi ekstrak etanol daun sirih terhadap pertumbuhan S. mutans secara in vitro. Metode yang digunakan adalah metode difusi cakram pada media agar darah, dengan mengukur diameter zona hambat di sekitar cakram yang telah diberi ekstrak daun sirih pada konsentrasi 5%, 10%, 20%, dan 40%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak, semakin besar zona hambat yang terbentuk. Kesimpulannya, ekstrak daun sirih memiliki potensi sebagai agen antibakteri terhadap S. mutans, dengan efektivitas yang meningkat seiring peningkatan konsentrasi.

Pendahuluan

Karies gigi merupakan salah satu penyakit yang paling umum di dunia dan disebabkan oleh aktivitas bakteri dalam rongga mulut, terutama Streptococcus mutans. Bakteri ini mampu mengubah karbohidrat menjadi asam, menurunkan pH lingkungan mulut, dan mendemineralisasi email gigi. Pengendalian populasi S. mutans menjadi strategi penting dalam pencegahan karies. Penggunaan obat kumur antiseptik sintetis seperti klorheksidin telah menjadi metode standar, namun memiliki efek samping seperti iritasi mukosa dan perubahan warna gigi.

Penggunaan bahan alam sebagai alternatif terapi antimikroba kini semakin berkembang. Daun sirih (Piper betle L.) merupakan tanaman tradisional Indonesia yang dikenal memiliki banyak manfaat kesehatan, terutama sebagai antiseptik dan antibakteri. Kandungan senyawa aktif dalam daun sirih, seperti eugenol, kavikol, flavonoid, dan tanin, berkontribusi dalam menghambat pertumbuhan berbagai mikroorganisme patogen. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh konsentrasi ekstrak daun sirih terhadap pertumbuhan S. mutans secara in vitro.

Metodologi

Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik dengan rancangan post-test only control group design.

Bahan dan Alat

• Daun sirih segar (diidentifikasi di herbarium fakultas biologi)
• Etanol 96% sebagai pelarut
• Media Agar Darah
• Cakram kertas steril
• Inokulum Streptococcus mutans (standar ATCC 25175)
• Mikropipet dan cawan petri steril
• Inkubator 37°C
• Penggaris digital/vernier caliper

Prosedur Ekstraksi

Daun sirih dicuci bersih, dikeringkan, dan dihaluskan. Serbuk daun kemudian diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan etanol 96% selama 72 jam, disaring, dan diuapkan menggunakan rotary evaporator untuk mendapatkan ekstrak kental.

Pembuatan Konsentrasi

Ekstrak dikonversi menjadi larutan pada konsentrasi 5%, 10%, 20%, dan 40% dengan pelarut DMSO (dimetilsulfoksida) 2%. Sebagai kontrol positif digunakan klorheksidin 0,12%, dan sebagai kontrol negatif digunakan DMSO 2% tanpa ekstrak.

Uji Antibakteri

Metode difusi cakram dilakukan dengan menanamkan bakteri S. mutans pada agar darah. Cakram yang telah direndam dalam masing-masing konsentrasi ekstrak diletakkan di atas permukaan media. Setelah inkubasi 24 jam pada 37°C, diameter zona hambat diukur.

Hasil

Hasil pengukuran diameter zona hambat menunjukkan bahwa semua konsentrasi ekstrak daun sirih memberikan efek penghambatan terhadap pertumbuhan S. mutans. Data rerata zona hambat (dalam mm) adalah sebagai berikut:

Analisis statistik dengan ANOVA satu arah menunjukkan perbedaan bermakna (p < 0,05) antar kelompok perlakuan. Uji lanjut Tukey menunjukkan bahwa semua konsentrasi memiliki perbedaan bermakna dibanding kontrol negatif.

Pembahasan

Hasil penelitian ini mendukung hipotesis bahwa ekstrak daun sirih memiliki aktivitas antibakteri terhadap S. mutans. Zona hambat yang meningkat seiring peningkatan konsentrasi ekstrak menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri daun sirih bersifat dosis-responsif. Kandungan senyawa aktif seperti fenol dan eugenol diketahui mampu merusak membran sel bakteri, menyebabkan lisis, dan menghambat pertumbuhan.

Dibandingkan dengan klorheksidin, efektivitas ekstrak pada konsentrasi 40% mendekati zona hambat klorheksidin, meskipun masih sedikit lebih rendah. Hal ini menunjukkan bahwa daun sirih berpotensi menjadi alternatif alami dengan toksisitas yang lebih rendah. Namun, perlu dicatat bahwa efektivitas in vitro belum tentu langsung dapat diterapkan secara klinis tanpa uji toksisitas dan uji klinis lanjutan.

Kesimpulan

Ekstrak daun sirih (Piper betle L.) terbukti memiliki efek antibakteri terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans secara in vitro. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak, semakin besar zona hambat yang terbentuk. Konsentrasi 40% menunjukkan efek penghambatan paling tinggi mendekati klorheksidin. Hasil ini menunjukkan potensi daun sirih sebagai agen antibakteri alami dalam upaya pencegahan karies gigi. Diperlukan penelitian lanjutan, termasuk uji toksisitas dan uji klinis, untuk pengembangan produk berbasis herbal dari ekstrak daun sirih.